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2011年04月25日 09:29研生elisa 銷(xiāo)售網(wǎng)點(diǎn)(上海研生實(shí)業(yè)有限公司)點(diǎn)擊量:1958
一、問(wèn):用HPLC進(jìn)行分析時(shí)保留時(shí)間有時(shí)發(fā)生漂移,有時(shí)發(fā)生快速變化,原因何在?如何解決?
答:關(guān)于漂移問(wèn)題:
1.溫度控制不好,解決方法是采用恒溫裝置,保持柱溫恒定
2.流動(dòng)相發(fā)生變化,解決辦法是防止流動(dòng)相發(fā)生蒸發(fā)、反應(yīng)等
3.柱子未平衡好,需對(duì)柱子進(jìn)行更長(zhǎng)時(shí)間的平衡
關(guān)于快速變化問(wèn)題
1.流速發(fā)生變化,解決辦法是重新設(shè)定流速,使之保持穩(wěn)定
2.泵中有氣泡,可通過(guò)排氣等操作將氣泡趕出。
3.流動(dòng)相不合適,解決辦法為改換流動(dòng)相或使流動(dòng)相在控制室內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)混合
二、問(wèn):液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因是什么?
答:1.篩板堵塞或柱失效,解決辦法是反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子。
2.存在干擾峰,解決辦法為使用較長(zhǎng)的柱子,改換流動(dòng)相或更換選擇性好的柱子
三、問(wèn):HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法
答:1.樣品量不足,解決辦法為增加樣品量 醫(yī).學(xué)教育網(wǎng)搜集整理
2.樣品未從柱子中流出。可根據(jù)樣品的化學(xué)性質(zhì)改變流動(dòng)相或柱子
3.樣品與檢測(cè)器不匹配。根據(jù)樣品化學(xué)性質(zhì)調(diào)整波長(zhǎng)或改換檢測(cè)器
4.檢測(cè)器衰減太多。調(diào)整衰減即可。
5.檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)太大。解決辦法為降低時(shí)間參數(shù)
6.檢測(cè)器池窗污染。解決辦法為清洗池窗。
7.檢測(cè)池中有氣泡。解決辦法為排氣。
8.記錄儀測(cè)壓范圍不當(dāng)。調(diào)整電壓范圍即可。
9.流動(dòng)相流量不合適。調(diào)整流速即可。
10.檢測(cè)器與記錄儀超出校正曲線。解決辦法為檢查記錄儀與檢測(cè)器,重作校正曲線。
四、問(wèn):做HPLC分析時(shí),柱壓不穩(wěn)定,原因何在?如何解決?
答:原因可能有:
1.泵內(nèi)有空氣,解決的辦法是清除泵內(nèi)空氣,對(duì)溶劑進(jìn)行脫氣處理;
2.比例閥失效,更換比例閥即可;
3.泵密封墊損壞,更換密封墊即可;
4.溶劑中的氣泡,解決的辦法是對(duì)溶劑脫氣,必要時(shí)改變脫氣方法;
5.系統(tǒng)檢漏,找出漏點(diǎn),密封即可;
6.梯度洗脫,這時(shí)壓力波動(dòng)是正常的。
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